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任何HPLC系統(tǒng)的一個重要部分是檢測器。HPLC檢測器設(shè)計用于識別和定量流動相通過系統(tǒng)攜帶樣品的各個組分。
HPLC系統(tǒng)中可以使用多種檢測器,決定使用哪一種檢測器取決于樣品及其單個化合物的性質(zhì),或者取決于流動相和樣品在通過HPLC系統(tǒng)時成分變化時的體積特性。
任何HPLC檢測器都應(yīng)具備某些功能。其中包括:
對混合物中化合物存在特異性或一般反應(yīng)
靈敏度和響應(yīng)面向溶質(zhì),而不是流動相
低細(xì)胞體積,可最大限度地減少分析物條帶的分散
對溶質(zhì)濃度的線性響應(yīng)
溫度和流速的變化不應(yīng)影響檢測器響應(yīng)
以下是特定的HPLC檢測器:
質(zhì)譜檢測器 – 這種類型的檢測器提供高靈敏度和選擇性。分析物首先在離子源中電離,然后在檢測之前根據(jù)其質(zhì)量/電荷比分離這些離子。
紫外-可見分光光度計 HPLC 檢測器 – 紫外-可見分光光度計 HPLC 檢測器的類型包括固定波長、可變波長和二極管陣列。它們專門用于吸收光的化合物。
光電二極管陣列 (PDA) HPLC 檢測器 – 使用多個二極管可以同時監(jiān)測不同波長的多種吸收化合物。
熒光HPLC檢測器 – 這是最·靈敏和特異的。類型包括單波長、多波長和激光誘導(dǎo)探測器。這種類型依賴于化合物自然熒光或衍生化,將熒光標(biāo)簽添加到目標(biāo)分析物中,從而進(jìn)行檢測。
以下是體積特性HPLC檢測器:
電導(dǎo)率HPLC檢測器–這些檢測器的工作原理是使用由流通池組成的傳感器測量流動相電導(dǎo)率,流通池包含兩個由鉑、鋼或貴金屬制成的電極。
折射率HPLC檢測器 – 檢測依賴于流動相折射率的變化,因為存在洗脫化合物 RI檢測器的靈敏度最·低,但通常被認(rèn)為是通用檢測器。
電化學(xué)HPLC檢測器–包括平衡和動態(tài)檢測器,它們對流動相的組成或流速的變化敏感,對可還原或可氧化的物質(zhì)敏感。
光散射HPLC檢測器 – 有兩種類型,包括低角度激光光散射和多角度激光散射檢測器。它們測量散射光,這是檢測高分子量分子的理想選擇,因為洗脫液通過基于分子大小的傳感器池。